一、直鏈淀粉研究的意義
支鏈-直鏈-總淀粉含量測定的主要目的是能準(zhǔn)確檢測出其中的直鏈淀粉;直鏈淀粉是以α-1,4 糖苷鍵連接而成的數(shù)千個單位長的、極少分支的葡萄糖鏈狀分子,其分子結(jié)構(gòu)對淀粉的糊化特性有很大影響。經(jīng)濟(jì)作物中的直鏈淀粉含量是影響作物感官品質(zhì)和加工特性的一個重要因素,其含量在評價作物品質(zhì)和農(nóng)業(yè)選種、育種時具有實際意義。
二、直鏈淀粉含量測定方法
直鏈淀粉含量的測定,國內(nèi)目前有國標(biāo)GB/T 15683-2008 《大米 直鏈淀粉含量的測定》與農(nóng)業(yè)部的NY/T2639-2014《稻米直鏈淀粉的測定 分光光度法》,還有有兩個地方標(biāo)。但是,國內(nèi)權(quán)威測定標(biāo)準(zhǔn)的原理是一樣的,采用碘比色法測定。
但是,支鏈淀粉-碘復(fù)合物在此過程中同樣會形成,導(dǎo)致直鏈淀粉含量高估,需要進(jìn)行校正。國外,采用伴刀豆球蛋白法,即根據(jù)伴刀豆球蛋白(Con A)能夠與多個非還原性末端基團(tuán)上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D- 吡喃甘露糖基單位特異性結(jié)合,再與淀粉中的支鏈淀粉成分特定的結(jié)合并生成沉淀,但是不能結(jié)合以線性為主的直鏈淀粉成分,最后通過測定反應(yīng)產(chǎn)物,進(jìn)而得到直鏈淀粉含量。如蘇州格銳思生物研發(fā)的G0548W 支鏈-直鏈-總淀粉含量試劑盒(酶法)。
三、測定的直鏈淀粉含量百分比的理解
在科研中經(jīng)常會測直鏈淀粉含量、支鏈淀粉含量;或者測直鏈淀粉、總淀粉;也有三個指標(biāo)同時測定。對于直鏈淀粉含量的概念也有兩種不同的表達(dá),一種是測直鏈淀粉占樣本干重的百分比,一種是測直鏈淀粉占總淀粉含量的百分比。但是后者的研究更有意義,所以測直鏈淀粉含量占總淀粉含量百分比的居多。
四、國標(biāo)與行標(biāo)測試的關(guān)鍵點
國標(biāo)測定中關(guān)鍵點之一:在于前處理脫脂,如果不進(jìn)行脫脂處理,脂類物質(zhì)會和碘爭奪直鏈淀粉形成復(fù)合物,影響測試結(jié)果。關(guān)鍵點之二: 標(biāo)準(zhǔn)品的純化與配比。國標(biāo)法根據(jù)直、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品不同的混合比例來計算樣品中直鏈淀粉的含量。但當(dāng)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品比例不相符合時,就會產(chǎn)生測量誤差。
總之,此法操作繁雜,需要測試人員具備良好的實驗技能和熟練的操作技巧。
五、實驗測定分析:(采用格銳思生物直鏈/支鏈/總淀粉含量(酶法)試劑盒 貨號:G0548W)
1、實驗材料:馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、遺傳改良粳稻、遺傳改良秈稻、糯小麥(以上材料均由相關(guān)科研單位提供)
2、樣本前處理:
酶法試劑盒測定直鏈淀粉關(guān)鍵之一,是樣本的前處理,測這個指標(biāo)與國標(biāo)要求一樣,樣本處理很關(guān)鍵。
處理方法:打磨成粉狀過篩。
如下圖:
3、根據(jù)格銳思生物公司試劑盒說明書完成實驗。
4、實驗結(jié)果:
樣本名稱 |
直鏈淀粉含量(%) |
市售糯米粉 |
1.7 |
遺傳改良秈稻 |
13.2 |
遺傳改良粳稻 |
11.7 |
糯小麥 |
1.7 |
小麥 |
20.4 |
玉米淀粉 |
21.4 |
馬鈴薯淀粉 |
25.1 |
65%直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品 |
64.5 |
六、已經(jīng)發(fā)表的文章
http://ahtly.cn/product/G0548W48
七:格銳思產(chǎn)品鏈接: